Dans la découverte de nouveaux médicaments, évaluer la santé de la cellule est une étape essentielle du processus de criblage. Les effets attendues des composés à l'étude doivent être évalués sur la viabilité des cellules cibles, tout comme leurs effets secondaires toxiques. Les cellules-souches pluripotentes induites ("iPS") constituent un outil innovant dans l'analyse de la toxicité. La cardiotoxicité est un effet secondaire létal de certains traitements médicamenteuxayant pour effet leur retrait du marché pour des raisons de sécurité. Pour démontrer l'intérêt des cardiomyocytes originaires de cellules iPS en tant que modèles de cellules hors cibles dans les études de toxicité, nous avons conduit des expériences parallèles sur une lignée de cellules cancéreuses K562 humaines et une lignée de cardiomyocytes iPS. Nous avons testé un choix de médicaments connus pour cibler les cellules cancéreuses et comparer les profils de toxicité entre les deux types de cellules. Pour évaluer la santé globale de la cellule et la cytotoxicité, nous avons utilisé le kit ApoTox-Glo™ Triplex Assay, une combinaison de chimies utilisée pour mesurer à la fois la viabilité, la cytotoxicité et l'apoptose. Les résultats présentés ici montrent comment le test ApoTox-Glo™ peut s'utiliser avec différents types cellulaires afin d'évaluer les effets de divers composés sur leurs cibles et sur des cellules hors cibles . 14 L'inhibiteur de la tyrosine kinase Imatinib cible la kinase bcr-abl mutante que l'on trouve dans les leucocytes des patients EVALUATION DES EFFETS CIBLÉS ET HORS CIBLES GRÂCE À UN MODÈLE CELLULAIRE DE CARDIOMYOCYTES IPS Cardiomyocytes Cytotoxicité CE50 > 36 µM Viabilité CE50 = 6,2 µM Caspase CE50 = ND K562 Cytotoxicité CE50 ~4 µM Viabilité CE50 = 5,6 µM Caspase CE50 = ~4 µM L'inhibiteur de la tyrosine kinase Imatinib exerce des effets cytotoxiques "hors-cible" sur les cardiomyocytes iPS . atteints de leucémie myéloïde chronique (LMC). La lignée immortalisée de cellules K562 provient d'un patient porteur d'une LMC et sert de modèle pour le développement des thérapies ciblant spécifiquement cette forme de cancer. Dans notre cas, une série de titration d'Imatinib a été appliquée à chaque lignée cellulaire, laquelle a ensuite été incubée pendant 24 heures à 37°C et 5% de CO2. Le test ApoTox-Glo™ a été réalisé après le traitement. Luminescence (ULR) Luminescence (ULR) NOTE D'APPLICATION Fluorescence (UFR) Fluorescence (UFR)

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