e g s d c s a extraire et d’un gel gel. cm dans les gels son traitement de rasoir. Avec son croisée. Utilisez l'instrument x-tracta™ Gel Extractor avec le gel Wizard® SV et le système PCR Clean Up 1. Exciser la bande d'ADN dans le gel et placer dans un tube de microcentrifugation. 2. Ajouter 10 μl de Membrane Binding Solution pour 10 mg de gel. Passer au vortex. Incuber à 50–65°C jusqu'à dissolution du gel. 3. Raccorder l'adaptateur de vide au port du collecteur et insérer une Minicolonne SV dans l'adaptateur. 5. Transférer le mélange dissous dans la Minicolonne. Incuber à température ambiante pendant 1 minute. 6. Appliquer le vide afin d'aspirer le liquide dans la Minicolonne. 7. Ajouter 700 μl de Membrane Wash Solution. Appliquer le vide afin d'aspirer la solution dans la Minicolonne. PRESSE R 8. Répétez le lavage avec 500 μl de Membrane Wash Solution. Appliquer le vide. 9. Transférer la Minicolonne dans un tube de collecte. Centrifuger à 16 000 x g pendant 5 minutes. 4 PRESSER pour distribuer sser vos andes 10. Vider le tube de collecte et recentrifuger l'assemblage de la colonne pendant 1 minute en laissant le capot de la microcentrifugeuse ouvert afin de laisser s'évaporer l'éthanol résiduel. 11. Transférer avec soin la Minicolonne dans un tube de microcentrifugation de 1,5 ml propre. 12. Ajouter 50 μl d'eau dépourvue de nucléases à la Minicolonne. Incuber à température ambiante pendant 1 minute. Centrifuger à 16 000 x g pendant 1 minute. 13. Conserver l'ADN élué à 4°C ou à –20°C. 13 Laver en éliminant la solution sous vide. Transférer la Minicolonne dans un tube de collecte. Préparer la pièce de gel ou le produit de PCR. Raccorder l'adaptateur de vide au collecteur et insérer la Minicolonne. Transférer le mélange dissous ou le produit de PCR préparé. Centrifuger. Eluer l'ADN. 10301MA
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Promega France - Monthly Online Magazine - Janvier 2012 Lees publicatie 10Home